3000轉染試劑是目前分子生物學和細胞生物學研究中廣泛使用的高效、低毒陽離子脂質體轉染試劑。它專為將外源核酸(如質粒DNA、siRNA、miRNA或CRISPR-Cas9組件)高效導入哺乳動物細胞而設計,適用于多種貼壁和部分懸浮細胞系,包括難轉染的原代細胞和干細胞。
其核心優勢在于其雙組分系統:除主轉染試劑Lipofectamine™3000外,還包含P3000™增強劑。P3000™可與DNA預先混合,優化核酸復合物的形成,顯著提升轉染效率和蛋白表達水平。該系統通過陽離子脂質體與帶負電的核酸結合,形成穩定的脂質-核酸復合物,通過內吞作用進入細胞,并在胞內釋放核酸,實現高效基因遞送。
1、基因功能研究
通過過表達或敲低特定基因,研究其在細胞增殖、分化、凋亡等過程中的作用。
示例:轉染腫瘤抑制基因質粒,觀察腫瘤細胞生長抑制現象。
2、基因編輯
與CRISPR/Cas9、TALEN等系統結合,實現基因敲除、敲入或點突變。
優勢:高轉染效率提升基因編輯成功率,簡化后續篩選步驟。
3、病毒包裝
生產慢病毒、腺病毒等病毒載體(如將慢病毒重組體質粒轉染293T細胞,收集病毒上清感染目標細胞)。
特點:支持大片段或復雜基因的包裝,病毒滴度高。
4、藥物研發
構建疾病模型(如轉染與阿爾茨海默病相關的基因突變質粒),篩選潛在藥物靶點。
示例:通過siRNA敲低藥物靶基因,評估化合物對細胞表型的影響。
5、蛋白生產
在哺乳動物細胞中高效表達重組蛋白(如抗體、酶),用于結構研究或功能驗證。
優勢:低細胞毒性減少對蛋白活性的影響。
